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心肌細(xì)胞培養(yǎng)基的廣泛應(yīng)用

更新時(shí)間:2015-10-19 點(diǎn)擊次數(shù):1433
     心肌細(xì)胞,是目前和將來(lái)*的人源心肌細(xì)胞來(lái)源。
    由于人類(lèi)心臟的生化和分子生物學(xué)特性,其心肌細(xì)胞的很多核心功能蛋白與小鼠等模式動(dòng)物不同。例如,小鼠心肌細(xì)胞主要表達(dá)α重鏈肌球蛋白,以適應(yīng)高頻率的搏動(dòng),而人類(lèi)心肌細(xì)胞主要表達(dá)β重鏈肌球蛋白,適應(yīng)低頻率的搏動(dòng)。此外,以Ito 和Ik為代表的鉀離子通道在不同種屬動(dòng)物及人類(lèi)心肌細(xì)胞間的表達(dá)和功能差異極大,對(duì)于動(dòng)作電位形成的貢獻(xiàn)也各不相同。
    傳統(tǒng)研究采用的心肌細(xì)胞, 主要是采用從新生或成年動(dòng)物心臟分離獲得的原代心肌細(xì)胞。同時(shí),此類(lèi)細(xì)胞還存在: 分離技術(shù)復(fù)雜繁瑣、缺少有效的純化方法、體外培養(yǎng)困難等缺陷。尤其是對(duì)于心臟生理接近人類(lèi)的大型哺乳動(dòng)物而言,分離原代心肌細(xì)胞的動(dòng)物成本極其高昂,而獲取的心肌細(xì)胞活性也更低。因此,ES/hiPS心肌細(xì)胞是此類(lèi)研究的的選擇由于傳統(tǒng)原代心肌細(xì)胞在培養(yǎng)中存活時(shí)間極短(成年動(dòng)物僅有數(shù)小時(shí),新生動(dòng)物不超過(guò)1周),絕大多數(shù)耗時(shí)較長(zhǎng)的心臟生理和病理學(xué)研究難以采用心肌細(xì)胞開(kāi)展,不得不選擇復(fù)雜且成本較高的動(dòng)物模型,甚至無(wú)法開(kāi)展。而ES/hiPS-心肌細(xì)胞的解決了這一問(wèn)題。
    心肌細(xì)胞在開(kāi)發(fā)方面的主要應(yīng)用:
    作為一種標(biāo)準(zhǔn)化的人源細(xì)胞產(chǎn)品,心肌細(xì)胞可以極大的促進(jìn)研發(fā)、提果評(píng)價(jià)和毒性測(cè)試。從而在占絕大多數(shù)的療效低下和具有潛在毒性的化合物進(jìn)入成本高昂的階段前,將它們排除出去。如果采用了心肌細(xì)胞進(jìn)行測(cè)試,不僅能夠排除具有心臟毒性的化合物,還能初步評(píng)價(jià)心血管類(lèi)的療效,極大的降低開(kāi)發(fā)成本,并且提率。
    心肌細(xì)胞培養(yǎng)基是專(zhuān)門(mén)為正常人類(lèi)心肌細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計(jì)的zui適于其生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(5%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進(jìn)正常人類(lèi)微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長(zhǎng),并為其達(dá)到營(yíng)養(yǎng)平衡狀態(tài)提供數(shù)量上和質(zhì)量上的保證。
 

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